Piñeyro Trezza, María Dolores

DATOS PERSONALES Y ACADÉMICOS

Grado y Servicio
Grado 3 / Facultad de Medicina / Departamento de Bioquímica

Contacto
Email: mpineyro@fmed.edu.uy / Teléfono: 24097183

Área disciplinar
Basica

Disciplina / Subdisciplina
Biología Molecular y Celular / Parasitología Molecular

Mayor nivel académico
Doctorado, Facultad de Ciencias (año 2005)

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Link a CVUY
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Pertenece al SNI
Si pertenece / Nivel I

Pertenece al PEDECIBA
Si pertenece / Grado 3

DATOS DEL PROYECTO DE DEDICACIÓN TOTAL

Título del Plan de Actividades
Estudio de la respuesta adaptativa de Trypanosoma cruzi al estrés oxidativo

Palabras clave
trypansoma cruzi, triparredoxina peroxidasa, triparredoxina, estrés oxidativo.

Resumen Publicable
La enfermedad de Chagas es una parasitosis endémica de la mayor parte del continente americano, que ocasiona importantes problemas de salud, con 10 millones de personas infectadas y 100 millones en riesgo de contraerla. El causante de esta enfermedad es el protozoario flagelado, Trypanosoma cruzi, cuyo complejo ciclo de vida incluye un estadio intracelular en un huésped mamífero. La invasión de estas células causa una exposición de los parásitos a agentes oxidantes, altamente tóxicos. Este parásito posee defensas antioxidantes únicas de tripanosomátidos, distintas a la de los mamíferos. Poseen enzimas para eliminar H2O2 dependientes del tiol tripanotión, molécula exclusiva de tripanosomátidos. Uno de ellos depende de la enzima triparredoxina peroxidasa (TXNPx), que cataliza la reducción de H2O2, peroxinitrito o hidroperóxidos. La TXNPx se mantiene reducida por la acción concertada de triparredoxina, tripanotión reductasa y el tripanotión, a expensas del NADPH. Existen en T. cruzi dos TXNPx: una citosólica y una mitocondrial, enzimas que pertenecen a una amplia familia de peroxidasas, las peroxirredoxinas (Prx). En mi trabajo de investigación, el objetivo general es el estudio de la respuesta adaptativa de Trypanosoma cruzi al estrés oxidativo, con énfasis en la búsqueda y caracterización de factores de virulencia. Para ello hemos caracterizado estructural y funcionalmente las TXNPxs de T. cruzi. Nuestro grupo, determinó la estructura tridimensional de la TXNPx citosólica y realizamos estudios de caracterización enzimática para ambas enzimas que sugieren su relevancia en las defensas antioxidantes en el parásito. Estudiamos el rol de ambas TXNPx en el proceso de infección, con parásitos que sobre-expresan ambas enzimas, los cuales fueron más infectivos y se multiplicaron más eficientemente que los controles, en experimentos de infección con células fagocíticas y no fagocíticas. Demostramos que estas enzimas se expresan en todos los estadios parasitarios. Asimismo, realizamos una caracterización in vivo del interactoma redox de la triparredoxina I, enzima que regenera a las TXNPx, participando en las cascadas de detoxificación de hidroperóxidos. También reducen proteínas blanco y cumplen otras funciones importantes para el parásito. Sin embargo, se conocían pocos blancos de las triparredoxinas en Tripanosomátidos. La triparredoxina actúa utilizando dos cisteínas conservadas: la Cys40 y el blanco oxidado forman un puente disulfuro transitorio, que se resuelve por la Cys43 de la triparredoxina, liberando la triparredoxina oxidada y el blanco proteico reducido. Basándonos en este mecanismo generamos un gen mutante en la cisteína resolutiva (TXNC43S) con la adición de una cola de histidinas, y generamos transfectantes con este gen. Purificamos los complejos proteína mutada-blancos mediante la cola de histidinas. Estos se analizaron por electroforesis y espectrometría de masas, identificándose varias proteínas redox-reguladas de vías inesperadas. Una de ellas está siendo estudiada en nuestro laboratorio.Actualmente, estamos viendo el rol de las TXNPxs con respecto a su relación con la virulencia de distintas cepas, estudiando que sucede con estas enzimas en cepas de T. cruzi virulentas y otras avirulentas. Para ello, estudiaremos su expresión en estas cepas, y complementando el estudio ver qué sucede cuando se disminuye la expresión de estas enzimas in vivo en las cepas más virulentas y se aumenta en las cepas menos virulentas. Otro aspecto que estamos empezando a estudiar, son las propiedades inmunomoduladoras de las TXNPx sobre las células del sistema inmune. El desarrollo de vacunas contra agentes infecciosos se centran no sólo en la caracterización de antígenos relevantes, pero también entender los factores que determinan la inmuno-protección. Se ha visto que algunas Prx con alta similitud con las TXNPxs se secretan al medio y se ha demostrado que pueden tener roles en procesos relacionados a la inflamación (Prx de Plasmodium Falciparum, y de parásitos helmintos). Queremos determinar si las TXNPxs poseen alguna función en relación al sistema inmune. Dependiendo de qué tipo de respuesta inmunológica podría generar, se podría modular el tipo de respuesta inmune y utilizar la TXNPx como antígeno para la generación de vacunas. La información proveniente de este trabajo podría dar datos para el diseño racional de drogas, y llevar al desarrollo de nuevos tratamientos. Nuestro trabajo sugiere que las TcTXNPx son factores de virulencia relevantes para la supervivencia de los parásitos en las células huésped y podrían ser candidatos para el diseño de drogas. Las que se usan actualmente tienen efectos secundarios muy tóxicos y generan resistencia a nivel del parásito. Asimismo, podrían generar información para un eventual desarrollo de vacunas contra T. cruzi. Este aspecto es crucial, ya que hasta el momento no existen vacunas disponibles para prevenir la enfermedad de Chagas en humanos.

Grado y Fecha de Ingreso al RDT
Grado 2 / Desde: 2006-03-07

Programa: Científico Proveniente del Exterior
El cargo NO se enmarca en este programa

Participa de Grupo Autoidentificado
Grupos: Grupo CSIC número 172725

Observaciones
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DOCUMENTACIÓN ADJUNTA

Curriculum Vitae
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Último informe de renovación
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Producción Académica
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